Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina (Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitro para la producción de antígenos

Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina (Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitro para la producción de antígenos

La babesiosis bovina ocasionada por Babesia bigemina produce grandes pérdidas a la economía pecuaria Mexicana. Debido a las variaciones antigénicas que presenta B. bigemina es necesario contar con antígenos locales para la realización de estudios epidemiológicos y de inmunización. Se recolectaron 30...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autores principales: I. Rodríguez Vivas, Roger, J. Quiñones Ávila, Franklin, T. Ramírez Cruz, Genny, Cruz, David, Wagner, Gale
Formato: Online
Idioma:spa
Publicado: Universidad de Costa Rica 2007
Acceso en línea:https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/6063
id RBT6063
record_format ojs
institution Universidad de Costa Rica
collection Revista de Biología Tropical
language spa
format Online
author I. Rodríguez Vivas, Roger
J. Quiñones Ávila, Franklin
T. Ramírez Cruz, Genny
Cruz, David
Wagner, Gale
spellingShingle I. Rodríguez Vivas, Roger
J. Quiñones Ávila, Franklin
T. Ramírez Cruz, Genny
Cruz, David
Wagner, Gale
Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina (Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitro para la producción de antígenos
author_facet I. Rodríguez Vivas, Roger
J. Quiñones Ávila, Franklin
T. Ramírez Cruz, Genny
Cruz, David
Wagner, Gale
author_sort I. Rodríguez Vivas, Roger
description La babesiosis bovina ocasionada por Babesia bigemina produce grandes pérdidas a la economía pecuaria Mexicana. Debido a las variaciones antigénicas que presenta B. bigemina es necesario contar con antígenos locales para la realización de estudios epidemiológicos y de inmunización. Se recolectaron 30 garrapatas Boophilus microplus de un bovino adulto clínicamente enfermo de babesiosis (B. bigemina) en Yucatán, México. En laboratorio se produjeron larvas, ninfas y una cepa congelada. El aislamiento de la cepa se realizó con éxito y se necesitó 30 días en el cultivo in vitro para obtener un PEI del 1.5 %. La cepa fue congelada en nitrógeno líquido y reactivada en el cultivo celular. La concentración del medio que permitió el mayor PEI (14 %, p < 0.05) fue: 30 % de suero bovino, 70 % de M199 y 5 % de volumen de eritrocitos. Las antígenos producidos fueron usado exitosamente en la prueba de IFI y la dilución que permitió diferenciar los positivos de los negativos fue suero 1:80 y conjugado 1:80.
title Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina (Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitro para la producción de antígenos
title_short Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina (Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitro para la producción de antígenos
title_full Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina (Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitro para la producción de antígenos
title_fullStr Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina (Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitro para la producción de antígenos
title_full_unstemmed Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina (Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitro para la producción de antígenos
title_sort aislamiento de una cepa de campo de babesia bigemina (piroplasma: babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitro para la producción de antígenos
title_alt Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina(Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitropara la producción de antígenos
publisher Universidad de Costa Rica
publishDate 2007
url https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/6063
work_keys_str_mv AT irodriguezvivasroger aislamientodeunacepadecampodebabesiabigeminapiroplasmababesiidaeyestablecimientodelcultivoinvitroparalaproducciondeantigenos
AT jquinonesavilafranklin aislamientodeunacepadecampodebabesiabigeminapiroplasmababesiidaeyestablecimientodelcultivoinvitroparalaproducciondeantigenos
AT tramirezcruzgenny aislamientodeunacepadecampodebabesiabigeminapiroplasmababesiidaeyestablecimientodelcultivoinvitroparalaproducciondeantigenos
AT cruzdavid aislamientodeunacepadecampodebabesiabigeminapiroplasmababesiidaeyestablecimientodelcultivoinvitroparalaproducciondeantigenos
AT wagnergale aislamientodeunacepadecampodebabesiabigeminapiroplasmababesiidaeyestablecimientodelcultivoinvitroparalaproducciondeantigenos
_version_ 1810114587860664320
spelling RBT60632022-05-30T19:06:49Z Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina(Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitropara la producción de antígenos Aislamiento de una cepa de campo de Babesia bigemina (Piroplasma: Babesiidae) y establecimiento del cultivo in vitro para la producción de antígenos I. Rodríguez Vivas, Roger J. Quiñones Ávila, Franklin T. Ramírez Cruz, Genny Cruz, David Wagner, Gale Babesia bigemina aislamiento cultivo in vitro antígeno porcentaje eritrocitos infectados isolation in vitro culture antigen percentage infected red blood cells Bovine babesiosis, caused by Babesia bigemina, is a barrier for livestock devel-opment; it results in high economic loss to Mexican livestock. Control requires adequate antigens for diagnosis and vaccination programs. However, because of antigenic variation among Babesia strains, it is necessary to use antigens prepared from local strains. The purpose of the present study was to isolate a local field strain and to establish the in vitro culture of B. bigemina by the evaluation of the constituent’s concentration of culture media. Thirty engorged female Boophilus microplus were collected from cattle suffering clinical babesiosis (B. bigemina) in Yucatan state, Mexico. These ticks were sent to the laboratory for detection of Babesia sp. vermicules. Eggs were kept at 83-85 % humidity and 27 ºC until hatching. Larvae were transferred to an esplenectomized calf (B-1). The resulting nymphs were transferred to an esplenectomized calf (B-2). Twelve days later, B. bigemina (local strain) was detected in calf B-2 and its infected blood was frozen in liquid nitrogen to initiate the in vitro culture. The Microaerophilus Stationary Phase (MASP) in vitro culture method was used to reactivate the parasite. Three differ-ent concentrations of culture media (70, 60 and 50 %), serum (30, 40 and 50 %) and uninfected red blood cells (5, 10 and 15 %) were used in order to know the convenient concentrations to obtain the highest percentage of infected red blood cells (PEI). The cultured strain was used to prepare antigens for the Immunofluorescence Antibody Test (IFAT) and several concentrations of serum and conjugate were tested. Strain isolation was successful; 30 days were needed to obtain a PEI of 1.5 %. The isolated strain was frozen in liquid nitrogen and the parasites were reactivated with the in vitro culture MASP method. The concentration of culture media that produced the highest PEI (14 %) (p&lt;0.05) was 30 % serum, 70 % M199 and 5 %. Uninfected Red Blood cells antigens were successfully used in the IFAT and the best dilutions to differentiate between positive and negative controls were serum 1:80 and conjugate 1:80. The isolated B. bigemina local strain requires particular conditions of in vitro culture by the MASP method to reach high numbers of infected red blood cells, needed to prepare and provide high quality antigens for serological diagnosis of B. bigemina. La babesiosis bovina ocasionada por Babesia bigemina produce grandes pérdidas a la economía pecuaria Mexicana. Debido a las variaciones antigénicas que presenta B. bigemina es necesario contar con antígenos locales para la realización de estudios epidemiológicos y de inmunización. Se recolectaron 30 garrapatas Boophilus microplus de un bovino adulto clínicamente enfermo de babesiosis (B. bigemina) en Yucatán, México. En laboratorio se produjeron larvas, ninfas y una cepa congelada. El aislamiento de la cepa se realizó con éxito y se necesitó 30 días en el cultivo in vitro para obtener un PEI del 1.5 %. La cepa fue congelada en nitrógeno líquido y reactivada en el cultivo celular. La concentración del medio que permitió el mayor PEI (14 %, p < 0.05) fue: 30 % de suero bovino, 70 % de M199 y 5 % de volumen de eritrocitos. Las antígenos producidos fueron usado exitosamente en la prueba de IFI y la dilución que permitió diferenciar los positivos de los negativos fue suero 1:80 y conjugado 1:80. Universidad de Costa Rica 2007-03-01 info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion Article Text application/pdf https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/6063 10.15517/rbt.v55i1.6063 Revista de Biología Tropical; Vol. 55 No. 1 (2007): Volume 55 – Regular number 1 – March 2007; 127–133 Revista de Biología Tropical; Vol. 55 Núm. 1 (2007): Volumen 55 – Número regular 1 – Marzo 2007; 127–133 Revista Biología Tropical; Vol. 55 N.º 1 (2007): Volume 55 – Regular number 1 – March 2007; 127–133 2215-2075 0034-7744 10.15517/rbt.v55i1 spa https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/6063/5768 Copyright (c) 2007 Revista de Biología Tropical http://creativecommons.org/licenses/by/4.0

Ejemplares similares