Evaluation of the effect of glicerol in the freezing process of canine semen

Detalles Bibliográficos
Autores principales: Herrera, E., Castro, L., Chacón, J.
Formato: Online
Idioma:spa
Publicado: Universidad Nacional, Costa Rica 2012
Acceso en línea:https://www.revistas.una.ac.cr/index.php/veterinaria/article/view/4681
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spelling VETERINARIA46812018-08-02T23:06:04Z Evaluation of the effect of glicerol in the freezing process of canine semen Evaluación del efecto del glicerol en el congelamiento de semen canino Herrera, E. Castro, L. Chacón, J. The main objective of this study was to standardize and evaluate the effect of different glycerol addition proto-ols over the sperm motility and the acrosome morphology after thawing in canine semen. Different concentra-ions of glycerol and different times of Tris-fructose with egg yolk addition were used. Four different protocolsere prepared. Each protocol had two dilution steps. In protocol 1, the first dilution used the extender but nolycerol and the second dilution used the extender plus 7% of glycerol. In protocol 2, both dilutions includedhe extender plus 3.5% of glycerol. In protocol 3, both dilutions used the extender plus 7% of glycerol. In pro-ocol 4, the first dilution used the extender plus 0% of glycerol, while the second dilution used the extenderlus 14% of glycerol. In all the protocols, the first dilution was carried out between 37 and 36°C, the extendedsemen was equilibrated at 7°C for one hour, while the second dilution was carried out at 7°C and subsequentlyquilibrated at 4°C for one hour.A total of 14 dogs of different breeds were selected for the study, which had a satisfactory andrological statusnd their semen presented a minimum of 80% normal morphology and progressive motility. From their ejacula-es, only the second fraction was collected and subsequently divided in 4 equal parts. The semen was packedn straws of 0.5 ml and they were frozen using the manual method. The straws were thawed in a water batht 70°C for 8 seconds, and the motility and acrosome morphology were immediately evaluated using a phaseontrast microscope.Post thawing, the semen showed an average motility of 51.25% (48.57% with protocol 1, 50.71% with protocol, 52.50% with protocol 3 and 53.21% with protocol 4) and the acrosome morphology using a phase contrasticroscope showed a percentage of normal acrosomes of 56.82% with protocol 1, 59.96% with protocol 2,9.18% with protocol 3 and 63.86% with protocol 4.Finally, there were not significant effects (p>0.05) of the time of glycerol addition or the different glycerol con-entrations used, on the percentages of progressive motility and normal acrosome morphology in post-thawedemen samples. Therefore, the canine semen appears to be resistant to the use of different concentrations oflycerol in the extender Tris-fructose with egg yolk. Likewise, the variation of time of glycerol addition did notave any influence on the post-thaw semen quality, in relation to the progressive motility and acrosome integrity. El objetivo del presente estudio fue estandarizar el procedimiento de congelamiento de semen canino y eva-uar diversas concentraciones y tiempos de agregación de glicerol en el diluyente “Tris-fructosa con yemae huevo” sobre la motilidad espermática y la morfología del acrosoma posdescongelamiento. Se usaron 4rotocolos con dos diluciones en cada uno, la primera dilución se realizó entre 37°C y 36°C y se equilibró porna hora a 7°C; la segunda se realizó a 7°C y se equilibró por una hora a 4°C. Los protocolos utilizados fueronos siguientes: 1) la primera dilución se realizó con glicerol al 0% y la segunda con glicerol al 7%; 2) la primera segunda dilución se hicieron con glicerol al 3.5%; 3) la primera y segunda dilución con glicerol al 7%; y 4) larimera dilución con glicerol al 0% y la segunda con glicerol al 14%.Para el estudio, se seleccionaron 14 perros de diversas razas, que presentaban al examen andrológico unstatus satisfactorio y cuyo examen seminal mostraba una motilidad progresiva y una morfología normal igual mayor al 80%. De cada animal, se recolectó la segunda fracción del eyaculado y se dividió en 4 porcionesguales. El semen fue empacado en pajillas de 0,5 ml y congelado bajo el método manual. Las pajillas seescongelaron en un baño de agua a 70°C por 8 segundos y seguidamente se evaluó la motilidad y el dañocrosómico con un microscopio de contraste de fases.Posterior al descongelamiento, se obtuvo una motilidad promedio de 51.25% (48.57% con el protocolo 1,0.71% con el protocolo 2, 52.50% con el protocolo 3 y 53.21% con el protocolo 4) y al evaluar la morfologíae los acrosomas por contraste de fases posdescongelamiento, se determinó un porcentaje de acrosomasormales de 56.82% con el protocolo 1, 59.96% con el protocolo 2, 59.18% con el protocolo 3 y 63.86% conl protocolo 4.Finalmente, no se encontraron diferencias significativas (p > 0.05) al variar la concentración de glicerol y eliempo de agregación del mismo. Por lo tanto, el semen canino parece ser resistente a diferentes concentra-iones de glicerol en el diluyente Tris-fructosa con yema de huevo y la variación en el tiempo de agregaciónel mismo no parece afectar la motilidad progresiva e integridad del acrosoma posdescongelamiento. Universidad Nacional, Costa Rica 2012-09-16 info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion application/pdf https://www.revistas.una.ac.cr/index.php/veterinaria/article/view/4681 Ciencias Veterinarias; Vol 26 No 1 (2008): Ciencias Veterinarias (Enero-Junio); 7-20 Ciencias Veterinarias; Vol. 26 Núm. 1 (2008): Ciencias Veterinarias (Enero-Junio); 7-20 2215-4507 0250-5649 spa https://www.revistas.una.ac.cr/index.php/veterinaria/article/view/4681/4588