Caracterización toxicológica, enzimática e inmunoquímica del veneno de referencia de Bothrops asper (Serpentes: Viperidae) de Panamá
RESUMEN: Introducción: Se estima que 2 000 mordeduras de serpiente ocurren en Panamá cada año, el 70% de las cuales son infligidas por B. asper. Objetivo: Determinar los efectos bioquímicos y toxicológicos y evaluar las características inmunoquímicas del veneno de referencia de B. asper uti...
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Universidad de Costa Rica
2021
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Uribe-Arjona, Alina de Patiño, Hildaura Acosta Martínez-Cortés, Víctor Correa-Ceballos, David Rodríguez, Abdiel Gómez-Leija, Leandra Vega, Natalia Gutiérrez, José María Otero-Patiño, Rafael Caracterización toxicológica, enzimática e inmunoquímica del veneno de referencia de Bothrops asper (Serpentes: Viperidae) de Panamá |
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RESUMEN: Introducción: Se estima que 2 000 mordeduras de serpiente ocurren en Panamá cada año, el 70% de las cuales son infligidas por B. asper. Objetivo: Determinar los efectos bioquímicos y toxicológicos y evaluar las características inmunoquímicas del veneno de referencia de B. asper utilizado experimentalmente en este trabajo. Métodos: El veneno se preparó como una mezcla homogénea de los venenos obtenidos de 78 especímenes adultos de esta especie recolectados en cuatro áreas geográficas de Panamá. Las actividades enzimáticas y toxicológicas se analizaron siguiendo las metodologías específicas de cada experimento. SDS-PAGE (gel al 15%) se realizó en condiciones reductoras. Posteriormente, se realizó la transferencia Western. Resultados: Se descubrió que este veneno tiene actividades letales, hemorrágicas, miotóxicas, formadoras de edema, coagulantes, desfibrinantes, actividad proteolítica y de fosfolipasa A2. El gel al 15% de SDS-PAGE mostró la presencia en este veneno de bandas de proteínas con pesos moleculares que varían de 8 a 70 kDa, con la presencia de bandas predominantes a ≈ 15 kDa y ≈ 30 a 66 kDa, que probablemente corresponden a las fosfolipasas A2 (la primera) y metaloproteinasas (esta última), respectivamente. A través de la inmunotransferencia, se observó un alto grado de reconocimiento por parte de varios antivenenos, principalmente de antivenenos colombianos y costarricenses. Conclusión: este veneno de referencia de B. asper será de gran utilidad para la evaluación preclínica de antivenenos. |
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Toxicological, enzymatic, and immunochemical characterization of Bothrops asper (Serpentes: Viperidae) reference venom from Panama |
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RBT395022023-10-25T15:21:58Z Toxicological, enzymatic, and immunochemical characterization of Bothrops asper (Serpentes: Viperidae) reference venom from Panama Caracterización toxicológica, enzimática e inmunoquímica del veneno de referencia de Bothrops asper (Serpentes: Viperidae) de Panamá Uribe-Arjona, Alina de Patiño, Hildaura Acosta Martínez-Cortés, Víctor Correa-Ceballos, David Rodríguez, Abdiel Gómez-Leija, Leandra Vega, Natalia Gutiérrez, José María Otero-Patiño, Rafael snakebite venom toxicity immunochemical characterization antivenom mordedura de serpiente veneno toxicidad caracterización inmunoquímica antiveneno ABSTRACT: Introduction: It is estimated that 2000 snakebites occur in Panama every year, 70% of which are inflicted by B. asper. Objective: To determine the biochemical and toxicologic effects and to assess the immunochemical characteristics of the reference B. asper venom experimentally used in this work. Methods: The venom was prepared as a homogeneous mixture of the venoms obtained from 78 adult specimens of this species collected in four geographic areas of Panama. Enzymatic and toxicologic activities were assayed following the specific methodologies of each experiment. SDS-PAGE (15% gel) was carried out under reducing conditions. Subsequently, Western blotting was performed. Results: It was found that this venom has lethal, hemorrhagic, myotoxic, edema-forming, coagulant, defibrinating, proteinase and phospholipase A2 activities. SDS-PAGE (15%) showed the presence in this venom of protein bands with molecular weights ranging from 8 to 70kDa, with the presence of predominant bands at ≈ 15kDa and ≈ 30 to 66kDa, which probably correspond to phospholipases A2 (the former) and metalloproteinases (the latter), respectively. Through immunoblotting, a high degree of recognition by various antivenoms was observed, mainly from Colombian and Costa Rican antivenoms. Conclusion: This B. asper reference venom will be highly useful for the preclinical evaluation of antivenoms. RESUMEN: Introducción: Se estima que 2 000 mordeduras de serpiente ocurren en Panamá cada año, el 70% de las cuales son infligidas por B. asper. Objetivo: Determinar los efectos bioquímicos y toxicológicos y evaluar las características inmunoquímicas del veneno de referencia de B. asper utilizado experimentalmente en este trabajo. Métodos: El veneno se preparó como una mezcla homogénea de los venenos obtenidos de 78 especímenes adultos de esta especie recolectados en cuatro áreas geográficas de Panamá. Las actividades enzimáticas y toxicológicas se analizaron siguiendo las metodologías específicas de cada experimento. SDS-PAGE (gel al 15%) se realizó en condiciones reductoras. Posteriormente, se realizó la transferencia Western. Resultados: Se descubrió que este veneno tiene actividades letales, hemorrágicas, miotóxicas, formadoras de edema, coagulantes, desfibrinantes, actividad proteolítica y de fosfolipasa A2. El gel al 15% de SDS-PAGE mostró la presencia en este veneno de bandas de proteínas con pesos moleculares que varían de 8 a 70 kDa, con la presencia de bandas predominantes a ≈ 15 kDa y ≈ 30 a 66 kDa, que probablemente corresponden a las fosfolipasas A2 (la primera) y metaloproteinasas (esta última), respectivamente. A través de la inmunotransferencia, se observó un alto grado de reconocimiento por parte de varios antivenenos, principalmente de antivenenos colombianos y costarricenses. Conclusión: este veneno de referencia de B. asper será de gran utilidad para la evaluación preclínica de antivenenos. Universidad de Costa Rica 2021-01-07 info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion Article application/pdf text/html https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/39502 10.15517/rbt.v69i1.39502 Revista de Biología Tropical; Vol. 69 No. 1 (2021): Revista de Biología Tropical (Rev. Biol. Trop.): Continuous publication, January - March 2021; 127–138 Revista de Biología Tropical; Vol. 69 Núm. 1 (2021): Revista de Biología Tropical (Rev. Biol. Trop.): Publicación continua, Enero - Marzo 2021; 127–138 Revista Biología Tropical; Vol. 69 N.º 1 (2021): Revista de Biología Tropical (Rev. Biol. Trop.): Continuous publication, January - March 2021; 127–138 2215-2075 0034-7744 10.15517/rbt.v69i1 eng https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/39502/44793 https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/39502/44794 Copyright (c) 2021 Recepción RBT, Hildaura Acosta de Patiño http://creativecommons.org/licenses/by/4.0 |