Effects of the fungus Pestalotiopsis maculans (Ascomycota: Amphisphaeriales) on the gametophytic development of the fern Lygodium venustum (Lygodiaceae)

El objetivo de este trabajo fue evaluar un protocolo de propagación de L. venustum mediante el cultivo in-vitro de esporas, empleando un procedimiento estándar de desinfección, para investigar su efecto en la germinación de esporas y el posterior gametofito, así como su respuesta por la inoculación...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autores principales:	Bejar, Juliera, Murace, Mónica A., Saparrat, Mario Carlos
Formato:	Online
Idioma:	eng
Publicado:	Universidad de Costa Rica 2019
Acceso en línea:	https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/35860

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description	El objetivo de este trabajo fue evaluar un protocolo de propagación de L. venustum mediante el cultivo in-vitro de esporas, empleando un procedimiento estándar de desinfección, para investigar su efecto en la germinación de esporas y el posterior gametofito, así como su respuesta por la inoculación con un hongo. Las esporas no tratadas con NaOCl al 10% (v/v) mostraron un mayor porcentaje de germinación en el medio agarizado Dyer (T0) comparado con las tratadas y sembradas en el medio suplementado con Nistatina al 1% (T1; (86.29 y 72% en 30 días, respectivamente). En T0, los gametofitos crecieron en asociación con Pestalotiopsis maculans, cuyos conidios fueron obtenidos también de las manchas negras de las hojas de L. venustum. Los gametofitos se desarrollaron en T0 y los inoculados con P. maculans se volvieron necróticos y murieron antes de producir gametangios. Los esporofitos surgieron después de 4 meses después de sembradas las esporas en T1, señalando que la metodología empleada aquí es adecuada para la conservación ex-situ de L. venustum.
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As part of our project focused on the conservation of native fern species in Argentina, the aim of this work was to evaluate a propagation protocol for L. venustum through in-vitro cultivation of spores, employing a standard procedure of disinfection, to investigate its effect on spore germination and the subsequent gametophyte as well as its response by the inoculation with a fungus. A batch of spores was previously treated with 10% (v/v) solution of NaOCl during 2 min and then sown in Dyer agar medium supplemented with 1% Nystatin (T1). The petri dishes were incubated in a growth chamber under white illumination (28μmol m-2 s-1) with a photoperiod of 12 hr and a temperature of 22±2°C. Another set of spores without previous disinfection was sown on Dyer agar medium and under the same conditions and used as a control (T0). Spore germination and gametophyte and sporophyte development were monitored through periodical observations under stereoscopic and light microscopes. As during cultures of non-disinfected spores a fungus developed in association with L. venustum gametophytes, its conidia were morphologically characterized as well as those obtained from the black spots present on the sporophyte leaves. A conidial suspension was applied to 20 days-old gametophytes obtained in axenic conditions to evaluate the appearance of any symptom. In both treatments (T1 and T0), spores germinated at 7 days after sowing. The pattern of spore germination followed the Anemia-type, unlike the Vittaria-type found by other researchers. Untreated spores showed a higher mean percentage of germination than those treated (86 and 72 % in 30 days, respectively). In T0 gametophytes grew in association with a fungus, whose conidia had the morphological characteristics of Pestalotiopsis maculans, as occurred with the conidia obtained from the black spots of L. venustum leaves. The association of P. maculans with L. venustum is reported here for the first time. The gametophytes developed in T0 and those inoculated with P. maculans became necrotic and died before producing gametangia, suggesting a pathogenic role of the fungus. The elevated percentage of spore germination registered in T0 could also indicate some effect of P. maculans or its metabolites in the promotion of spore germination. Gametophytes developed in T1 became bisexual or unisexual male, which points to the presence of some antheridiogen that induces the production of antheridia on smaller or slower-growing gametophytes. The sporophytes arose after 4 months of spore sown in T1, pointing out the methodology employed here suitable for the ex-situ conservation of L. venustum. El objetivo de este trabajo fue evaluar un protocolo de propagación de L. venustum mediante el cultivo in-vitro de esporas, empleando un procedimiento estándar de desinfección, para investigar su efecto en la germinación de esporas y el posterior gametofito, así como su respuesta por la inoculación con un hongo. Las esporas no tratadas con NaOCl al 10% (v/v) mostraron un mayor porcentaje de germinación en el medio agarizado Dyer (T0) comparado con las tratadas y sembradas en el medio suplementado con Nistatina al 1% (T1; (86.29 y 72% en 30 días, respectivamente). En T0, los gametofitos crecieron en asociación con Pestalotiopsis maculans, cuyos conidios fueron obtenidos también de las manchas negras de las hojas de L. venustum. Los gametofitos se desarrollaron en T0 y los inoculados con P. maculans se volvieron necróticos y murieron antes de producir gametangios. Los esporofitos surgieron después de 4 meses después de sembradas las esporas en T1, señalando que la metodología empleada aquí es adecuada para la conservación ex-situ de L. venustum. Universidad de Costa Rica 2019-12-01 info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion Article application/pdf text/html https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/35860 10.15517/rbt.v67i6.35860 Revista de Biología Tropical; Vol. 67 No. 6 (2019): Volume 67 – Regular number 6 – December 2019; 1520–1530 Revista de Biología Tropical; Vol. 67 Núm. 6 (2019): Volumen 67 – Número regular 6 – Diciembre 2019; 1520–1530 Revista Biología Tropical; Vol. 67 N.º 6 (2019): Volume 67 – Regular number 6 – December 2019; 1520–1530 2215-2075 0034-7744 10.15517/rbt.v67i6 eng https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/35860/40164 https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/35860/40165 Copyright (c) 2019 Juliera Bejar, Mónica A. Murace, Mario Carlos Saparrat http://creativecommons.org/licenses/by/4.0

Effects of the fungus Pestalotiopsis maculans (Ascomycota: Amphisphaeriales) on the gametophytic development of the fern Lygodium venustum (Lygodiaceae)

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