Isolation of bothrasperin, a disintegrin with potent platelet aggregation inhibitory activity, from the venom of the snake Bothrops asper

El veneno de la serpiente Bothrops asper induce graves alteraciones de la coagulación en los humanos accidentalmente envenenados. Sin embargo, se han realizado pocos estudios para identificar los componentes del veneno que interactúan con el sistema hemostático. En el presente trabajo, fraccionamos...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autores principales:	Pinto, Adrián, Angulo, Yamileth, Jiménez, Rafael, Lomonte, Bruno
Formato:	Online
Idioma:	eng
Publicado:	Universidad de Costa Rica 2003
Acceso en línea:	https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/15668

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spelling	RBT156682022-05-25T21:49:24Z Isolation of bothrasperin, a disintegrin with potent platelet aggregation inhibitory activity, from the venom of the snake Bothrops asper Isolation of bothrasperin, a disintegrin with potent platelet aggregation inhibitory activity, from the venom of the snake Bothrops asper Pinto, Adrián Angulo, Yamileth Jiménez, Rafael Lomonte, Bruno snake venom disintegrin bothrops platelet aggregation The venom of Bothrops asper induces severe coagulation disturbances in accidentally envenomed humans. However, only few studies have been conducted to identify components that interact with the hemostatic system in this venom. In the present work, we fractionated B. asper venom in order to investigate the possible presence of inhibitors of platelet aggregation. Using a combination of gel filtration, anion-exchange chromatography, and reverse-phase high performance liquid chromatography, we isolated an acidic protein which shows a single chain composition, with a molecular mass of ~8 kDa, estimated by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Its N-terminal sequence has high similarity to disintegrins isolated from different snake venoms, which are known to bind to cellular integrins such as the GPIIb/IIIa fibrinogen receptor on platelets. The purified protein exerted potent aggregation inhibitory activity on ADP-stimulated human platelets in vitro, with an estimated IC50 of 50 nM. This biological activity, together with the biochemical characteristics observed, demonstrate that the protein isolated from B. asper venom is a disintegrin, hereby named “bothrasperin”. This is the first disintegrin isolated from Central American viperid snake species. El veneno de la serpiente Bothrops asper induce graves alteraciones de la coagulación en los humanos accidentalmente envenenados. Sin embargo, se han realizado pocos estudios para identificar los componentes del veneno que interactúan con el sistema hemostático. En el presente trabajo, fraccionamos el veneno de B. asper para investigar la posible presencia de inhibidores de la agregación plaquetaria. Empleando una combinación de técnicas cromatográficas (filtración en gel, intercambio aniónico y cromatografía líquida de alto desempeño en fase reversa), aislamos una proteína acídica de cadena simple, con una masa molecular de ~8 kDa, estimada mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS. Su secaminoácidos N-terminal muestra una alta similitud con la de disintegrinas aisladas de diferentes venenos de serpiente, las cuales se unen a integrinas celulares como el receptor de fibrinógeno GPIIb/IIIa de las plaquetas. La proteína purificada ejerce una potente acción inhibitoria sobre la agregación in vitro de plaquetas humanas estimuladas con ADP, con una IC50 estimada en 50 nM. Esta actividad biológica, sumada a las características bioquímicas observadas, demuestran que la proteína aislada del veneno de B. asper es una disintegrina, a la cual denominamos “bothrasperina”. Esta es la primera disintegrina aislada de una especie de vipéridos de Centroamérica. Universidad de Costa Rica 2003-03-01 info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion Article application/pdf https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/15668 Revista de Biología Tropical; Vol. 51 No. 1 (2003): Volume 51 - Regular number 1 - March 2003; 253–260 Revista de Biología Tropical; Vol. 51 Núm. 1 (2003): Volumen 51 - Número regular 1 - Marzo 2003; 253–260 Revista Biología Tropical; Vol. 51 N.º 1 (2003): Volume 51 - Regular number 1 - March 2003; 253–260 2215-2075 0034-7744 10.15517/rbt.v51i1 eng https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/rbt/article/view/15668/15019 Copyright (c) 2003 Revista de Biología Tropical http://creativecommons.org/licenses/by/4.0
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Isolation of bothrasperin, a disintegrin with potent platelet aggregation inhibitory activity, from the venom of the snake Bothrops asper

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