Optimización de la transformación genética con Agrobacterium rhizogenes

Optimización de la transformación genética con Agrobacterium rhizogenes

Para optimizar la eficiencia en la transformación genética con Agrobacterium rhizogenes, secciones de zanahoria fueron inoculadas con la cepa de Agrobacterium A4TC y co-cultivadas con acetosiringona, floroglucinol y una combinación de ambos. La acetosiringona es uno de los compuestos fenólicos que l...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autores principales: Blanco, Mónica, Valverde, Roberto, Gómez, Luis
Formato: Online
Idioma:spa
Publicado: Universidad de Costa Rica 2003
Acceso en línea:https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/agrocost/article/view/61655
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spelling AGROCOST616552024-08-30T17:32:36Z Optimization of genetic transformation with Agrobacterium rhizogenes Optimización de la transformación genética con Agrobacterium rhizogenes Blanco, Mónica Valverde, Roberto Gómez, Luis Genetic transformation Agrobacterium rhizogenes acetosyringone phloroglucinol Transformación genética Agrobacterium rhizogenes acetosiringona floroglucinol To optimize the genetic transformation efficiency using Agrobacterium rhizogenes, carrot sections inoculated with the Agrobacterium strain A4TC were co-cultivated with acetosyringone, phloroglucinol, and a mix of both. Acetosyringone is one of the phenolic compounds produced by plant tissues in response to wounding, which induces the transfer of T-DNA from the agrobacteria to the plant. Phloroglucinol is also a phenolic compound; however, it has a synergistic action with auxins by partially inhibiting cytokinin activity. The highest transformation efficiency (75%) was obtained with acetosyringone (100 mM) in combination with phloroglucinol (25 mg l-1). In general, a 6-day co-cultivation, independently of treatments, induced the best transformation rate. Inclusion of 100 mg l-1 kanamicin efficiently discriminated transformed roots from non-transgenic ones. This paper also presents a novel bacterial elimination method, by which Agrobacterium can be completely eliminated in 48 h with Cefotaxime at a dosage of 500 ml l-1. Para optimizar la eficiencia en la transformación genética con Agrobacterium rhizogenes, secciones de zanahoria fueron inoculadas con la cepa de Agrobacterium A4TC y co-cultivadas con acetosiringona, floroglucinol y una combinación de ambos. La acetosiringona es uno de los compuestos fenólicos que liberan los tejidos vegetales como respuesta a heridas, el cual induce la transferencia del T-ADN de la agrobacteria a la planta. El floroglucinol es también un compuesto fenólico; sin embargo, ejerce un efecto sinergístico con las auxinas, inhibiendo parcialmente la actividad de las citocininas. La mayor eficiencia en la transformación (75%) se obtuvo con el uso de acetosiringona (100 mM) en combinación con floroglucinol (25 mg l-1). En general, 6 días de co cultivo, independientemente de los tratamientos, fue el tiempo que indujo el mayor porcentaje de transformación. La inclusión de 100 mg l-1 de kanamicina resultó un mecanismo eficiente para discriminar entre raíces transformadas y no transformadas. En adición, este trabajo presenta un novedoso sistema con el cual, una vez realizada la transformación, la bacteria puede ser eliminada completamente en 48 h con Cefotaxime en dosis de 500 mg l-1. Universidad de Costa Rica 2003-01-01 info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion Article Artículo application/pdf https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/agrocost/article/view/61655 10.15517/rac.v27i1.61655 Agronomía Costarricense; Agronomía Costarricense: Vol. 27, Issue 1 (January-June); 19-28 Agronomía Costarricense; Agronomía Costarricense: Vol. 27, Nº 1 (Enero-junio); 19-28 2215-2202 0377-9424 10.15517/rac.v27i1 spa https://revistas.ucr.ac.cr/index.php/agrocost/article/view/61655/61062 Derechos de autor 2024 Agronomía Costarricense https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0
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